Chemically 大腸桿菌 生化試劑
簡要描述：
Chemically 大腸桿菌 生化試劑，Chemically 大腸桿菌化學感受態細胞TG1來源于E. coli K-12菌株，是目前生長速度最快的克隆用大腸桿菌菌株。F′附加體上的lacIq的存在使其能嚴謹型調控表達含大腸桿菌啟動子（由lac操縱子序列控制，比如：T5，trc，tac）的載體。。
產品時間：2024-03-21
打印當前頁TG1 Chemically Competent Cell
大腸桿菌化學感受態細胞
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產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
TG1 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學感受態細胞 | MF2327-1000UL | 10×100μl | 410 |
MF2327-5000UL | 50×100μl | 1730 |
菌株描述
TG1來源于E. coli K-12菌株，是目前生長速度最快的克隆用大腸桿菌菌株。F′附加體上的lacIq的存在使其能嚴謹型調控表達含大腸桿菌啟動子（由lac操縱子序列控制，比如：T5，trc，tac）的載體。TG1是常用的噬菌體展示用菌株，也適用于普通質粒的構建，lacIqZΔM15的存在使其可用于藍白斑篩選等實驗。
TG1菌株基因型：F’ [traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15] supE thi-1 Δ(mcrB-hsdSM)5(rK-mK-) Δ(lac-proAB)
產品描述
本品是大腸桿菌TG1菌株經特殊工藝制作所得的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。經pUC19質粒檢測轉化效率可達1×109 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩定保存幾個月轉化效率不發生改變。
產品包裝
組分名稱 | 貨號（規格） | ||
MF2327-1000UL | MF2327-5000UL | ||
MF2327-A | TG1 Chemically Competent Cell | 10×100μl | 50×100μl |
MF2327-B | Control Vector puC19, 10pg/μl | 10μl | 10μl |
保存與運輸條件：
保存：-80℃保存，六個月有效。
運輸：干冰運輸。
注意事項
1） 感受態細胞必須用干冰運輸，感受態細胞應在-80℃保存。
2） 感受態細胞在冰上融化，不可在冰上放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
3） 進行轉化操作時，需在相應溫度及無菌條件下進行。
4） 為防止轉化實驗不成功，可保留部分連接反應液以重新轉化，將損失降到最*-低。
5） 產品包裝內含質粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供對照實驗用。
6） 后續進行陽性菌落的擴繁和高純質粒的獲取，推薦選用TB培養基（Terrific Broth），優于LB或SOC。
7） TG1菌株不含核酸酶endA1突變，體內核酸酶含量較高，質粒提取時，推薦使用質粒提取試劑盒中的去蛋白液，為求去除菌體內大量的核酸酶。
8） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在無菌條件的標準下進行】
1） 從-80℃冰箱取出取感受態細胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物），用手輕彈管底輕輕混勻（避免用槍吸打），冰浴靜置25min。
2） 42℃水浴熱激45s，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2min。此過程不要搖動離心管。
3） 向每個離心管中加700 μl無菌的2YT或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，200 rpm振蕩培養60min，目的使質粒上相關的抗性標記基因表達，使菌體復蘇。
4） 低速離心收菌（比如5000rpm，1min），留取100μl左右上清，用槍輕輕吹打重懸菌塊，之后加到含所選質粒篩選抗生素的2YT或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于室溫（或37℃）直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養過夜（12-15h）。
【注意】：
a）涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA總量較多，可不用離心，直接取少量轉化產物涂布平板；反之，若轉化的DNA總量較少，則通過離心（5000 rpm，1min）后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。原則是以在平板上能挑到單克隆菌落為宜。
b）新制備的固體培養基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
Chemically 大腸桿菌 生化試劑
Chemically 大腸桿菌 生化試劑