Stbl3化學感受態細胞（不穩定DNA轉化）

Stbl3 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學感受態細胞

產品標簽：

Stbl3；Stbl2；HB101；Stable；Direct repeats 直接重復片段；Lentiviral expression vectors 慢病毒表達載體；In-fusion 一步法克隆檢測試劑盒；

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產品組分：

菌株描述

Stbl3菌株來源于大腸桿菌HB101菌株，特別適用于克隆不穩定插入片段比如含有直接重復序列的慢病毒DNA。與*0菌株不同，Stbl3菌株減少了存在于慢病毒表達載體和一些其他腺病毒載體中長末端重復序列（LTRs）的同源重組頻率，有效降低錯誤重組。Stbl3有更高的基因組克隆容量。此菌株含鏈霉素抗性。

Stbl3菌株基因型：F-mcrB mrrhsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ-leumtl-1

產品描述

本品是Stbl3菌株經特殊工藝制作所得的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。經pUC19質粒檢測轉化效率＞10⁸ cfu/μg DNA。且在-80℃能穩定保存幾個月轉化效率不發生改變。

注意事項

1）   對不穩定DNA克隆或逆轉錄病毒/慢病毒載體克隆，涂板后應在30℃培養，以減少錯誤重組的發生概率。

2）   制備高純度病毒質粒，需使用新鮮轉化的平板接菌，新鮮菌液提取質粒，菌液不可低溫保存后使用。

3）   對不穩定的克隆或病毒質粒優先以質粒狀態保存，盡量避免以轉化在大腸桿菌細胞的方式保存質粒。

4）   轉化時SOC或LB培養基均可用，前者能提高轉化效率約20%。

5）   感受態細胞必須用干冰運輸。感受態細胞應在-80℃保存，不可反復凍融且放置時間過長，否則會減低感受態細胞的轉化效率。

6）   醉好在冰上融化感受態細胞。

7）   進行轉化操作時，需在相應溫度及無菌條件下進行。

8）   為防止轉化實驗不成功，可保留部分連接反應液以重新轉化，將損失降到zui低。

9）   產品包裝內含質粒pUC19 DNA(10 pg/μl)，供對照實驗用。

10）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

Stbl3感受態細胞常見問題【詳細問題請見懋康網站MKbio介紹】

1.      使用Stbl3感受態細胞時，如何提高病毒質粒的產量？

2.      是否能用*0或DH5α代替Stable或Stbl3擴繁病毒質粒？

3.        使用Stbl3，*0感受態細胞構建或擴增病毒質粒時，平板上長出的克隆有的偏大，有的偏小，如何選擇哪種克隆用于后續實驗？

4.      Stbl3的基因型為F-mcrB mrrhsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (StrR) xyl-5 λ-leu mtl-1，如何理解各個基因？

5.      轉化過程中感受態細胞的復蘇必須使用SOC培養基？

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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Stbl3化學感受態細胞（不穩定DNA轉化）

Stbl3化學感受態細胞（不穩定DNA轉化）