Fluo-3, AM, 鈣離子熒光探針，超級純
簡要描述：
Fluo-3, AM, 鈣離子熒光探針，超級純：Fluo-3是一種常用的可見光激發波長Ca2+熒光探針，具有較高的Ca2+捕獲能力，通過熒光強度的變化直接反映Ca2+信號的動力學變化。
產品時間：2024-11-07
打印當前頁Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針，超級純（95%）
【務必注意】：初次使用離子探針的用戶，強烈建議配合：Pluronic F-127, Cell Culture Tested 細胞培養級（MS4301-1G）一起使用，以提高探針的水溶性和胞內加載性。
搜索關鍵詞：
Fluo-3 AM；Fluo-4, AM；Rhod-2 AM；Rhod-4 AM；Fura-2 AM；可見光激發波長Ca2+熒光探針；CAS：121714-22-5；
產品信息：
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針，超級純(95%) | MX4503-1MG-A | 20×50μg | 4245 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針，超級純（95%） | MX4503-1MG-B | 1mg | 2965 |
| Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針，標準純（90%） | MX4503-1MG-C | 1mg | 2535 |
基本介紹：
Fluo-3是一種常用的可見光激發波長Ca2+熒光探針，具有較高的Ca2+捕獲能力，通過熒光強度的變化直接反映Ca2+信號的動力學變化。當Fluo-3以游離配體形式存在時幾乎是非熒光性的，但一旦與Ca2+結合即可產生很強的熒光，熒光信號增強60~80倍，此時的大激發波長為506nm，大發射波長為526nm。可通過激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、熒光酶標儀等來檢測胞內鈣離子水平的變化。
Fluo-3, AM是Fluo-3的一種乙酰甲酯衍生物，具有細胞膜滲透性，只需簡單培養，即可輕易進入細胞。一旦進入細胞內，即被其內酯酶剪切生成不具膜滲透性的Fluo-3，從而滯留在胞內以發揮相應生理功能。本品以凍干粉的形式提供，使用時只需經無水DMSO充分溶解，配置成2~5mM的儲存液，并依據具體實驗和相關文獻資料調整到需要的工作濃度即可。
產品特性
CAS NO：121714-22-5 | 同義名：Fluo-3, Acetoxymethyl Ester |
分子式：C51H50Cl2N2O23 | 分子量：1129.85 |
純度：≥95% (HPLC) | 解離常數（Kd）：390nM (Ca2+) |
大激發/發射波長：506/526 nm | 溶解性：溶于DMSO（2-5mM） |
化學結構式： | |
保存與運輸方法
保存：-20℃干燥避光保存，有效期至少1年。
運輸：冰袋運輸。
注意事項
1） 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
2） 乙酰氧基甲基酯（AM）易吸潮，冰箱取出后請在干燥的環境放至室溫后再開封。由于試劑微量，開封前請將其短暫離心，以保證粉末落入管底。
3） Fluo-3, AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內，可在20-25℃溫育片刻至全部融解后使用。
4） 基于BAPTA結構的鈣離子指示劑比如Fluo-3，Fluo-4，能夠結合很多重金屬陽離子（比如：Mn2+、Zn2+、Pb2+）且實質上親和力高于Ca2+。因此，由于這些重金屬離子存在對鈣測定的干擾可使用重金屬螯合劑-TPEN（MX4529-25MG）來控制。
5） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法（針對人T細胞Ca2+濃度檢測）
A， 試劑準備
1） 配制Pluronic F-127母液
100mgPluronic F-127粉末（貨號：MS4301-100MG）中加入500μl DMSO，配制成20%(w/v) DMSO母液。溶解過程需要在40-50℃加熱20-30min。溶液室溫保存，不用冷藏。如有結晶析出，可以重新加熱后溶解，不影響使用。
2）Hanks Balanced Salt Solution（HBSS），w/o Ca2+，Mg2+
3）HEPES Buffer Saline
配方：10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl2，0.5mM MgCl2，5mM glucose，0.1% BSA，pH 7.4
B， 操作步驟
1） 用無水DMSO溶解Fluo-3, AM配制成2-5mM的儲存液，或將已配好的Fluo-3, AM儲存液取出于室溫回溫。（如：若配制成4mM的母液，需向50µg Fluo-3,AM中加入11µl無水DMSO）。
2） 向Fluo-3, AM+DMSO溶液中加入等體積的20% Pluronic F-127溶液，Pluronic F-127可以防止Fluo-3, AM在HBSS中聚合并促使探針更好進入細胞。【注】：Pluronic F-127可降低Fluo-3, AM的穩定性，因此只建議在配制工作液時加入，不建議將其加入儲存液長期保存。
3） 用HBSS稀釋Fluo-3, AM溶液，制備2-5µM的Fluo-3, AM工作液。【注】：推薦該探針加載濃度在4-5µM，具體的使用濃度需根據實驗要求進行優化。為了避免過度加載造成細胞毒性，建議在取得有效結果的基礎上盡量使用zui低濃度探針。
4） 將Fluo-3, AM工作液加入細胞，加入量以覆蓋細胞為準。37℃孵育20min。
5） 加入5倍體積的含有1% FBS的HBSS，繼續孵育40min。
6） 用HEPES Buffer Saline洗滌細胞3次，然后用HEPES Buffer Saline使細胞重懸，制成1×105cells/ml的溶液。
7） 37℃孵育10min，之后用流式細胞儀或者共聚焦顯微鏡進行熒光鈣離子檢測。大激發波長506nm，大發射波長526nm。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
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