IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷
簡要描述：
IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷，誘導(dǎo)細(xì)菌lac或tac操縱子調(diào)控的基因轉(zhuǎn)錄，尤其是水解酶β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）。一旦表達(dá)，β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖為單糖。IPTG通常用于β-gal活性分析，當(dāng)含大腸桿菌來源lacZ基因的載體轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞后，編碼表達(dá)β-gal，細(xì)胞裂解后，通過催化底物ONPG的顏色反應(yīng)即可定量分析活性。
產(chǎn)品時間：2024-03-25
打印當(dāng)前頁IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷/重組蛋白表達(dá)誘導(dǎo)物/啟動lacZ基因
產(chǎn)品關(guān)鍵詞：
IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷；X-gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷；β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）；lac repressor 乳糖阻遏物；lacZ Operon lacZ操縱子；Blue-white Screening 藍(lán)白斑篩選；CAS NO.: 367-93-1
基本描述:
IPTG，英文全名Isopropyl-beta-D-thiogalactoside，中文全名異丙基-β-D-硫代半乳糖苷，CAS NO：367-93-1，誘導(dǎo)細(xì)菌lac或tac操縱子調(diào)控的基因轉(zhuǎn)錄，尤其是水解酶β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）。一旦表達(dá)，β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖為單糖。IPTG通常用于β-gal活性分析，當(dāng)含大腸桿菌來源lacZ基因的載體轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞后，編碼表達(dá)β-gal，細(xì)胞裂解后，通過催化底物ONPG的顏色反應(yīng)即可定量分析活性。IPTG也是硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙酰基酶的底物，文獻(xiàn)報道還能誘導(dǎo)合成細(xì)菌青霉素酶。體內(nèi)研究IPTG的一個重要優(yōu)勢在于，IPTG不會大腸桿菌所代謝，IPTG濃度和lac p/o控制基因表達(dá)都保持穩(wěn)定。
IPTG誘導(dǎo)lacZ表達(dá)的作用機(jī)制:
IPTG的主要生理功能:
1）β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）活性檢測
β-半乳糖苷酶（β-galactosidase，β-gal）由大腸桿菌lacZ基因編碼，是zui常用的一種報告酶，用來研究哺乳動物細(xì)胞的基因表達(dá)，蛋白-蛋白相互作用，以及標(biāo)準(zhǔn)化轉(zhuǎn)染效率。
檢測原理：IPTG誘導(dǎo)lacZ基因表達(dá)β-半乳糖苷酶（β-gal），細(xì)胞裂解后，體系中加入無色的ONPG（鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷），被β-gal水解為鄰硝基苯酚（o-nitrophenol），生成黃色（420nm）。顏色反應(yīng)的強(qiáng)度與β-gal活性成正比
2）藍(lán)白斑篩選（Blue-white screening）
IPTG普遍用在需要誘導(dǎo)β-gal活性的克隆步驟中，zui為常見的就是和X-gal聯(lián)合使用進(jìn)行藍(lán)白斑克隆篩選，或與Magenta-gal聯(lián)合使用進(jìn)行紅/白斑克隆篩選。
作用機(jī)理： 當(dāng)目的基因插入載體lacZ基因，破壞β-gal表達(dá)并阻止其表達(dá)。細(xì)菌在含X-gal的培養(yǎng)基上生長，β-gal水解此底物生成一不可溶藍(lán)色產(chǎn)物，菌落呈藍(lán)色。若β-gal不能表達(dá)，細(xì)菌克隆則無法催化X-gal底物，菌落呈白色，以此區(qū)分轉(zhuǎn)化重組載體或非重組載體的克隆子。
3）重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
IPTG也可用于重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)。在這些體系中，待研究蛋白在IPTG誘導(dǎo)型啟動子下游編碼。IPTG誘導(dǎo)待研究蛋白表達(dá)，對細(xì)胞裂解后，使用一系列合適方法來純化蛋白，如His-tag或GST-tag純化系統(tǒng)（融合相應(yīng)標(biāo)簽的重組蛋白）。
產(chǎn)品特性
1）CAS NO：367-93-1
2）英文同義名：Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside; Isopropyl β-D-thiogalactoside; IPTG;
3）中文同義名：異丙基-β-D-硫代半乳糖苷；異丙基 β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷；
4）分子式：C9H18O5S
5） 分子量：238.30 g/mol
6） 純度：≥99%（基于干重，HPLC）
7） 外觀：白色結(jié)晶粉末
8） 雜質(zhì)：≤0.1% Dioxane（二氧六環(huán)）
9） 溶解性：溶于水、乙醇
10）化學(xué)結(jié)構(gòu)：
使用方法【詳見maokangbio】
- IPTG儲存液配制
- 藍(lán)白斑篩選方法
- IPTG誘導(dǎo)重組蛋白的表達(dá)
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | CAS NO. | 規(guī)格 | 價格（元） | 貨期 |
MF2002-5G | IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 76455-82-8 | 5g | 195 | 現(xiàn)貨 |
MF2002-10G | IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 76455-82-8 | 10g | 350 | 現(xiàn)貨 |
MF2002-100G | IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 76455-82-8 | 100g | 1800 | 現(xiàn)貨 |
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | CAS NO. | 規(guī)格 | 價格（元） | 貨期 |
MM2005-1G | ONPG 鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷 | 369-07-3 | 1g | 115 | 現(xiàn)貨 |
MS5510-10G | DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫蘇糖醇 | 3483-12-3 | 10g | 380 | 現(xiàn)貨 |
MS0839-5G | D-(-)-Arabinose D-(-)-阿拉伯糖 | 10323-20-3 | 5g | 70 | 現(xiàn)貨 |
MP1610-1ML | 廣譜型蛋白酶抑制劑混合物（不含EDTA，100× DMSO儲液） | / | 1ml | 380 | 現(xiàn)貨 |
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷
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